正相色譜和反相色譜的應(yīng)用場(chǎng)合介紹

更新時(shí)間：2017-12-06瀏覽：8329次

在液相色譜儀分析中，根據(jù)流動(dòng)相和固定相相對(duì)極性的不同，可分為正相色譜和反相色譜。所謂正相色譜是指固定相極性大于流動(dòng)相極性的情況，反之，固定相的極性小于流動(dòng)相的極性，則稱(chēng)為反相色譜。

正相分析的場(chǎng)合：

假設(shè)使用的溶劑是15%二氯甲烷/己烷混合溶液，樣品在二氯甲烷中更易溶解。如果樣品可以在流動(dòng)相中*溶解自然沒(méi)有問(wèn)題。

如果樣品不能溶解在溶劑中，選擇100%二氯甲烷作為溶劑的情況下可能會(huì)產(chǎn)生故障。

在一般情況下，經(jīng)常使用混合溶劑作為流動(dòng)相。哪種組合zui易于樣品溶解可以從樣品的洗脫時(shí)間上看出。在選擇溶解樣品的

溶劑之前，把流動(dòng)相的組成在5~10%變化范圍內(nèi)各種樣品的洗脫時(shí)間作比較，選擇樣品zui容易溶解的溶劑。因?yàn)椋瑯悠泛腿?/div>

劑、流動(dòng)相互相溶解是分析的前提條件。

反相分析的場(chǎng)合：

假設(shè)使用的溶劑是50%的乙腈，使用的樣品在乙腈中比在水中更易溶解。當(dāng)然，的方法是使樣品*溶解于流動(dòng)相中。

然而，如果樣品不能溶解在流動(dòng)相中，如何選擇溶劑呢？100%的乙腈溶液？或者濃度50%以下的乙腈水溶液？

這種情況下，*個(gè)選擇就是濃度50%以下的乙腈水溶液。第二個(gè)選擇就是100%的水溶液，可以100~500微升注入。

zui差的選擇是100%乙腈溶液。因?yàn)榧词箻悠?溶解在了100%的乙腈溶液中，隨著流動(dòng)相的加入，可能乙腈溶液被稀釋

導(dǎo)致樣品析出。輕則造成上述a,b兩種故障，重則向c,d發(fā)展。zui嚴(yán)重則發(fā)生f的故障，那就只能更換色譜柱了。

然而，混合樣品的情況下可能發(fā)生g的故障。判斷樣品會(huì)不會(huì)在色譜柱內(nèi)部析出可以通過(guò)以下步驟。減少樣品較易溶解的

溶劑量，然后試著增加注入量。也就是說(shuō)，如果是要求注入在100%乙腈溶液中溶解的樣品20ul，可以試著注入在20%乙腈

中溶解的樣品125ul。如果上述的故障消失了，則說(shuō)明使用100%乙腈作為溶劑是不合適的，樣品會(huì)在色譜柱內(nèi)析出。

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