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化學(xué)分析的新利器:一探反相色譜柱的多功能作用!

更新時間:2025-06-11瀏覽:28次
  反相色譜柱是一種在液相色譜分析中常用的色譜柱,其核心特點在于固定相為非極性材料,而流動相為極性溶劑。具有高靈敏度和選擇性,能夠檢測出低濃度的成分,甚至達到痕量級別,同時實現(xiàn)不同成分的有效分離,尤其適用于復(fù)雜樣品的分析。其穩(wěn)定性好,色譜峰形狀和出峰時間穩(wěn)定,且應(yīng)用范圍廣泛,適用于多種不同類型和濃度的樣品分析,如蛋白質(zhì)、核酸、藥物、食品等。
  反相色譜柱的主要作用:
  1、分離極性化合物
  反相色譜柱(如C18柱)的固定相為非極性(如十八烷基硅烷鍵合相),流動相為極性溶劑(如水、甲醇、乙腈等)。
  疏水性強的組分與固定相吸附更緊密,保留時間較長;極性強的組分優(yōu)先被極性流動相洗脫,保留時間較短。
  適用對象:肽類、核酸、有機酸、藥物活性成分等極性或中等極性物質(zhì)。
  2、復(fù)雜樣品的組分分析
  通過調(diào)整流動相的極性(如改變甲醇/水比例)、pH值或添加劑(如三氟已酸TFA),優(yōu)化不同組分的分離度。
  示例:蛋白質(zhì)消化后的多肽混合物、中藥提取物中的活性成分分析。
  3、制備級純化
  在制藥、天然產(chǎn)物提取等領(lǐng)域,利用反相色譜柱進行大規(guī)模制備,收集高純度目標(biāo)組分(如95%以上)。
  特點:可處理復(fù)雜基質(zhì),減少雜質(zhì)干擾。
  4、去除雜質(zhì)或污染物
  在生物制藥中,用于去除酶解產(chǎn)物中的鹽分、未反應(yīng)底物或變性蛋白。
  在環(huán)境檢測中,分離水體中的極性污染物(如農(nóng)藥、抗生素)。
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