抗體分析色譜柱是專門用于分離、純化和分析抗體及其相關(guān)分子的高效液相色譜柱,在生物制藥、生物技術(shù)及科研領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用。其核心原理基于抗體與固定相之間的特異性相互作用(如親和、離子交換、疏水或尺寸排阻),結(jié)合流動(dòng)相的梯度洗脫,實(shí)現(xiàn)抗體分子與雜質(zhì)的高效分離。
其采用高純度、高交聯(lián)度的填料基質(zhì)(如聚苯乙烯二乙烯基苯、硅膠等),確保色譜柱的化學(xué)穩(wěn)定性和耐壓性。同時(shí),通過優(yōu)化填料粒徑和孔徑分布,提高柱效和分離度,滿足高精度分析需求。此外,部分色譜柱還配備親水涂層或特殊化學(xué)鍵合相,減少非特異性吸附,提高抗體回收率。
抗體分析色譜柱的技術(shù)性能特點(diǎn):
1、寬分子量范圍覆蓋
SEC柱典型分子量范圍:5-500 kDa,適合完整抗體(約150 kDa)及其片段分析。
可區(qū)分單體(150 kDa)、二聚體(300 kDa)及更大分子量的聚集體。
2、高回收率與低吸附
采用惰性基質(zhì)(如瓊脂糖、硅膠或聚合物),減少非特異性吸附,保護(hù)抗體活性。
SEC柱在等度條件下操作,樣品可直接回收用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3、耐堿性與兼容性
耐受高pH環(huán)境(如HIC柱可在pH 7-8運(yùn)行),適合穩(wěn)定性測試。
兼容多種緩沖體系(如磷酸鹽、醋酸鹽、Tris緩沖液),適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)需求。
抗體分析色譜柱貫穿抗體藥物的研發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制全過程。在研發(fā)階段,可用于抗體篩選、結(jié)構(gòu)表征和變異體分析;在生產(chǎn)階段,可用于純化工藝優(yōu)化和產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)控;在質(zhì)量控制階段,可用于檢測抗體藥物的純度、活性和穩(wěn)定性,確保藥品安全有效。